Научный журнал
Научное обозрение. Медицинские науки
ISSN 2500-0780
ПИ №ФС77-57452

РОЛЬ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ОЦЕНКЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Телекулова А.М. 1 Назарова Ю.В. 1 Немерешина О.Н. 1
1 ГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России»
В настоящее время остается актуальной проблема разработки оптимальных методик экспресс анализа биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье. Авторами статьи были проведены исследования на определение основных групп биологически активных веществ в экстрактах шести видов лекарственных растений народной медицины Урала с использованием широко известного метода хроматографии в тонком слое. Для хроматографирования использовались системы растворителей в различных соотношениях, пластинки российского и чешского производства разной длины. Основной целью являлось определение оптимальных условий для проведения анализа. В результате было выявлено значительное количество веществ полифенольной природы практически во всех видах растительного сырья, что может служить поводом для более подробного исследования изученных видов растений в дальнейшем.
лекарственные растения
биологически активные вещества
хроматография в тонком слое
1. Государственная Фармакопея ХIII изд., Т. 3. – М., 2015. – С. 134–138.
2. Немерешина О.Н., Гусев Н.Ф., Петрова Г.В. Изучение биологически активных веществ в растениях Veronica chamaedrys L. и V. officinalis L. // Успехи современного естествознания. – 2013. – № 8. – С. 113–118.
3. Сумина Е.Г., Штыков С.Н., Угланова В.З., Кулакова Н.В. Тонкослойная хроматография. Теоретические основы и практическое применение. – Саратов: Изд-во Саратовского государственного университета, 2012. – 128 с.
4. Хлебников А.В., Олешко Г.И., Гусев Н.Ф. Запасы сырья лекарственных растений в западных и северо-западных районах Оренбургской области. // Растительные ресурсы. – 1989. – Т. 25. – № 2. – С. 180.

К настоящему моменту в медицинской практике используется большое количество биологически активных веществ, относящихся к группе вторичных метаболитов растений [2]. Одними из наиболее популярных являются растительные полифенолы. Совместно с аскорбиновой кислотой полифенолы способны укреплять стенки кровеносных сосудов, стимулировать процессы кроветворения и регенерации, нормализовать окислительные процессы в организме. В связи с этим, становится актуальным вопрос быстрой и качественной оценки содержания соединений групп биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье. В данном случае, наиболее оптимальным решением представляется использование метода тонкослойной хроматографии.

Тонкослойная хроматография – это один из наиболее простых и известных вариантов жидкостной хроматографии, в котором разделение компонентов подвижной фазы происходит на открытом слое сорбента. К преимуществам данного метода относятся быстрота и легкость выполнения, а также низкие затраты. Однако, разработка и подбор оптимальной методики для исследований могут представлять значительную сложность [3].

Так как флора Оренбургской области характеризуется широким разнообразием видов лекарственных растений, то её можно рассматривать как дополнительный источник биологически активных веществ [4].

В связи с этим, цели нашего исследования:

1. Анализ компонентного состава экстрактов из шести видов растений, применяемых в народной и официальной медицине, методом тонкослойной хроматографии.

2. Выявление оптимальных условий для хроматографирования.

В качестве объектов исследования были взяты экстракты лекарственного растительного сырья следующих растений:

Боярышник кроваво-красный (Crataegus sanguinea), морковь посевная (Daucus carota), кровохлёбка лекарственная (Sanguisorba officinalis), шалфей лекарственный (Salvia officinalis), малина обыкновенная (Rubus idaeus), подорожник большой (Plantago major), марьянник луговой (Melampyrum pratense), вероника длиннолистная (Veronica longifolia).

Экстракты готовились с использованием 70 % этилового спирта по стандартной методике Государственной Фармакопеи XIII издания (фармакопейная статья «Экстракты») [1].

В качестве систем растворителей использовались смеси бутанола, уксусной кислоты и воды в разных соотношениях (4:1:5 и 4:1:3). Пробы 6 экстрактов наносились капиллярами в виде точек на две пластинки чешской фирмы «Silufol» длиной 13 см и 15 см, а также на пластинку российской фирмы «Sorbfil» длиной 10 см.

Хроматограммы были обработаны парами 25 % аммиака, расшифровка велась в УФ-свете. Для обнаружения флуоресцирующих веществ использовали источник света с максимумами излучения в области 254 и 365 мкм. Также применялась обработка хромогенными реактивами по методике ВИЛАР.

Полученные результаты представлены в табл. 1 и 2. С помощью метода тонкослойной хроматографии выявлено, что наибольшим разнообразием групп биологически активных веществ отличаются экстракты кровохлебки лекарственной, боярышника кроваво-красного и шалфея лекарственного, а наименьшее разнообразие состава наблюдается в экстрактах сырья малины обыкновенной, марьянника лугового, подорожника большого и вероники длиннолистной.

Таблица 1

Результаты хроматографического исследования на пластинках «Sorbfil»

Вид растения

пятна

Окраска

Пятна

Rf

Группа

веществ

БУВ 4:1:5

Боярышник

кроваво-красный

1

2

3

4

Желто-коричневое

Желтое

Голубое

Желтое

0,31

0,46

0,75

0,88

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Морковь

посевная

1

2

3

4

Светло-желтое

Коричневое

Голубое

Ярко-голубое

0,13

0,25

0,41

0,75

Фенолокислоты

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Кровохлебка

лекарственная

1

2

3

4

Черное

Светло-коричневое

Голубое

Коричневое

0,2

0,38

0,5

0,66

Танниды

Флавоноиды

Фенолокислоты

Флавоноиды

Шалфей

лекарственный

1

2

3

4

5

6

Коричневое

Бурое

Желто-коричневое

Грязно-голубое

Желтое

Грязно-желтое

0,08

0,19

0,25

0,45

0,69

0,88

Флавоноиды

Танниды

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Малина

обыкновенная

1

2

3

4

5

6

Светло-коричневое

Темно-коричневое

Светло-коричневое

Коричневое

Голубое

Голубое

0,19

0,26

0,34

0,5

0,79

0,89

Флавоноиды

Флавоноиды

Флавоноиды

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Таблица 2

Результаты хроматографического исследования на пластинках «Silufol»

Вид растения

Пластинка

№ пятна

Окраска пятна

Rf

Группа веществ

БУВ 4:1:5

Малина обыкновенная

1

1

Голубое

0,85

Фенолокислоты

Шалфей лекарственный

1

2

3

Желто-зеленое

Бурое

Светло-бурое

0,10

0,27

0,85

Фенолокислоты

Танниды

Танниды

Кровохлебка лекарственная

1

2

3

4

Темно-бурое

Голубое

Бурое

Желтое

0,2

0,45

0,85

0,90

Танниды

Фенолокислоты

Танниды

Полифенолы

Морковь посевная

1

2

3

Ярко-голубое

Бурое

Темно-бурое

0,79

0,25

0,86

Фенолокислоты

Танниды

Танниды

Боярышник кроваво-красный

1

2

3

4

Грязно-желтое

Ярко-голубое

Желтое

Бурое

0,13

0,75

0,83

0,91

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Полифенолы

Танниды

Марьяник луговой

2

1

2

Оранжевое

Темно-синее

0,92

0,66

Полифенолы

Фенолокислоты

Шалфей лекарственный

1

2

3

Желто-коричневое

Бурое

Желтое

0,042

0,83

0,86

Флавоноиды

Танниды

Полифенолы

Малина обыкновенная

1

2

3

Оранжевое

Ярко-желтое

Бурое

0,72

0,76

0,88

Полифенолы

Фенолокислоты

Танниды

Вероника длиннолистная

1

2

3

Коричневое

Ярко-желтое

Светло-желтое

0,059

0,75

0,83

Флавоноиды

Полифенолы

Фенолокислоты

Подорожник большой

1

2

Оранжевое

Голубое

0,88

0,83

Полифенолы

Фенолокислоты

БУВ 4:1:3

Кровохлебка лекарственная

3

1

Бурое

0,027

Танниды

Морковь посевная

 

1

2

Желтое

Темно-бурое

0,9

0,89

Полифенолы

Танниды

Шалфей лекарственный

 

1

2

Темно-оранжевое

Ярко-желтое

0,84

0,89

Полифенолы

Фенолокислоты

Подорожник большой

 

1

2

Светло-желтое

Бурое

0,93

0,96

Полифенолы

Танниды

Марьянник луговой

 

1

2

Светло-коричневое

Бурое

0,95

0,98

Флавоноиды

Танниды

При оценке яркости пятен обнаружено, что соединения полифенольной природы преобладают в экстрактах боярышника кроваво-красного, шалфея лекарственного, моркови посевной и подорожника большого; флавоноидной природы – в листьях малины обыкновенной, вероники длиннолистной и марьянника лугового; по содержанию таннидов особо можно выделить экстракт кровохлебки лекарственной, в меньшем количестве танниды обнаружены в экстрактах шалфея лекарственного, моркови посевной и малины обыкновенной.

Как уже известно, на качество разделения веществ в тонкослойной хроматографии влияет множество факторов, наиболее значимыми из которых являются следующие: тип выбранной системы; стартовый размер пятна; расстояние от старта до нижнего края пластинки; толщина и равномерность нанесения сорбента; длина пластинки; объем растворителя; наличие посторонних примесей в элюенте.

Результаты исследования позволяют утверждать, что выбранная нами для исследования система растворителей бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:5) способствует оптимальному разделению компонентов экстрактов. На пластинках марки «Sorbfil» наблюдались более четкие пятна, однако на пластинках марки «Silufol», имеющих большую длину, исключалось накладывание пятен друг на друга, что повышает точность расшифровки. Напомним, что представленные нами результаты являются примером для проведения только предварительного анализа.

Учитывая, что все рассмотренные нами виды растительного сырья Оренбургской области содержат значительное количество веществ полифенольной группы, то это может послужить поводом для их более подробного изучения в дальнейшем.

В настоящий момент ведутся исследования по изучению состава и влияния полифенольных соединений, которые содержатся во многих лекарственных растениях, в частности, веронике лекарственной, и обуславливают её антиоксидантные, противовоспалительные и антимикробные свойства [2].

Тонкослойная хроматография – наиболее известный, простой и оптимальный метод, применяемый для предварительных исследований. Наилучшие результаты хроматографирования достигаются при использовании системы растворителей бутанол-уксусная кислота-вода в соотношении 4:1:5, а наибольшая четкость пятен наблюдается на пластинках российской фирмы «Sorbfil», пробег должен быть не менее 13–15 см.


Библиографическая ссылка

Телекулова А.М., Назарова Ю.В., Немерешина О.Н. РОЛЬ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ОЦЕНКЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ // Научное обозрение. Медицинские науки. – 2017. – № 3. – С. 79-82;
URL: https://science-medicine.ru/ru/article/view?id=1002 (дата обращения: 24.07.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674