Научный журнал
Научное обозрение. Медицинские науки
ISSN 2500-0780
ПИ №ФС77-57452

ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ В БУККАЛЬНЫХ ЭПИТЕЛИОЦИТАХ У РАБОТНИКОВ ГОРНОРУДНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ В ВОЗРАСТЕ ДО 30 ЛЕТ

Садртдинова Г.Р. 1 Шайхлисламова Э.Р. 1 Масягутова Л.М. 1, 2 Ахметшина В.Т. 1 Рафикова Л.А. 1 Музафарова А.Р. 1
1 ФБУН «Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека»
2 ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Представлены данные о цитогенетических нарушениях буккального эпителия у молодых горнорабочих в возрасте от 20 до 30 лет, которые подвергались воздействию промышленных аэрозолей с комплексным химическим составом (диоксид кремния, медь, цинк и свинец). Исследование цитогенетических нарушений в буккальном эпителии у горнорабочих с разным стажем работы было проведено с целью оценки влияния профессиональной деятельности на состояние клеток слизистой оболочки полости рта. Эти исследования показывают, что молодые работники горнодобывающей промышленности в первые годы своей трудовой деятельности сталкиваются с рядом изменений на клеточном уровне. Особый интерес вызывает увеличение общей частоты цитогенетических нарушений в клетках буккального эпителия в этот период. Исследования показывают, что у молодых горнорабочих наблюдается увеличение количества клеток, содержащих микроядра, а также клеток с признаками нарушения пролиферации. Эти изменения свидетельствуют о потенциальном повреждении ДНК и нестабильности генома. Кроме того, в этот период наблюдается снижение интенсивности апоптоза, который является процессом программированной клеточной смерти. Эти результаты указывают на значимость промышленных аэрозолей сложного химического состава в возникновении цитогенетических нарушений у молодых горнорабочих.
буккальный эпителий
микроядра
микроядерный тест
химическая промышленность
1. Рахманов Р.С., Блинова Т.В., Колесов С.А, Страхова Л.А., Трошин В.В, Умнягина И.А., Сапожникова М.А. Оценка прогностической значимости функциональных и биохимических показателей в оценке состояния здоровья работающих молодого возраста, занятых в трубном производстве // Кубанский научный медицинский вестник. 2017. № 1 (2).С. 123-128. DOI: 10.25207/1608-6228-2017-2-123-128.
2. Зайдуллин И.И., Каримова Л.К., Кабирова М.Ф., Садртдинова Г.Р., Галимова Р.Р., Валеева Э.Т. Использование микроядерного теста для оценки состояния пародонта у работников, подвергающихся воздействию вредных веществ // Гигиена и санитария. 2020. № 99 (9). С. 956-960. DOI: 10.47470/0016-9900-2020-99-9-956-960.
3. Лестев М.П., Береснева О.Ю., Липатов Я.Г., Еловикова М.Т., Адриановский И.В., Седых Н.А. Генотоксич- и цитотоксич- эффекты в БЭ работников предприятия по производству черной меди // Здоровье населения и среда обитания. 2013. № 9 (246). С. 17-18.
4. Дерюгина А.В., Иващенко М.Н., Игнатьев П.С., Самоделкин А.Г., Белов А.А., Гущин В.А. Оценка генотоксичных эффектов в буккальном эпителии при нарушениях адаптационного статуса организма // Клиническая лабораторная диагностика. 2018. № 63(5). С. 290-292. DOI: 10.18821/0869-2084-2018-63-5-290-292.
5. Sellappa S., Sadhanandhan B., Francis A., Vasudevan S.G. Evaluation of genotoxicity in petrol station workers in South India using micronucleus assay // Ind Health. 2010. № 48 (6). Р. 852-856. DOI: 10.2486/indhealth.ms1055.
6. Rehani S., Raj N., Jeergal P., Sharma M., Bishen K.A., Nagpal R. Genotoxicity in Oral Mucosal Epithelial Cells of Petrol Station Attendants: A Micronucleus Study // J. Cytol. 2021. № 38 (4). Р.225-230. DOI: 10.4103/JOC.JOC_44_21.
7. Садртдинова Г.Р., Масягутова Л.М., Шайхлисламова Э.Р., Зайдуллин И.И., Иванова Р.Ш. Цитогенетические особенности БЭ у рабочих при воздействии промышленных аэрозолей // Санитарный врач. 2020. № 7. С. 39-46. DOI: 10.33920/med-08-2007-05.
8. Трофимчук А.А., Кабирова М.Ф., Гуляева О.А., Каримова Л.К., Саляхова Г.А. Оценка риска развития заболевания ротовой полости у работников горно-обогатительного комбината, которые заняты добычей и переработкой медно-цинковых руд // Уральский медицинский журнал. 2018. № 4 (159). С. 52-54.
9. Юрченко В.В. Микроядерный тест на БЭ человека. Полиорганный микроядерный тест в ЭГИ. М.: Гениус, 2007. 267 с.
10. Петрашова Д.А., Пожарская В.В., Муравьев С.В. Цитогенетич. нарушения в БЭ у горнорабочих Мурманской области в возрасте до 30-и лет // Проблемы современной науки и образования. 2016. № 26 (68). С. 26-31.
11. Сычева Л.П. Цитогенетический мониторинг для оценки безопасности среды обитания человека // Гигиена и санитария. 2012. № 6. С. 68-72.
12. Юрченко В.В. Микроядерный тест на буккальных эпителиоцитах человека. Полиорганный микроядерный тест в эколого-гигиенических исследованиях. М.: Гениус, 2007. 312 с.
13. Петрашова Д.А., Пожарская В.В., Муравьев С.В. Цитогенетические нарушения в буккальном эпителии у горнорабочих Мурманской области в возрасте до тридцати лет // Проблемы современной науки и образования. 2016. № 26 (68). С. 26-31.
14. Юров И.Ю., Ворсанова С.Г., Воинова В.Ю., Чурносов М.И., Юров Ю.Б. Цитогенетические, молекулярные и клинические основы генетически обусловленных болезней: учебное пособие. М.: Издательский дом Академии Естествознания, 2019. 164 с.
15. Пожарская В.В., Петрашова Д.А. Цитогенетические нарушения в лимфоцитах периферической крови у горнорабочих Мурманской области в возрасте до тридцати лет // Вестник науки и образования. 2016. № 10 (22). C. 15-19.

В РФ сохранение здоровья трудового населения стало ключевой проблемой для медицинской науки [1]. Несмотря на внедрение современных технологий и автоматизацию производства, химический фактор в различных отраслях, включая горнодобывающую промышленность, по-прежнему остается значимым. Это особенно актуально, поскольку воздух рабочих зон может содержать в достаточной степени опасные концентрации вредных веществ.

Профессиональные заболевания среди работников горнодобывающей промышленности – серьезная проблема. В Башкортостане добычу и переработку руд (медно-цинковых) осуществляют ГОК в количестве 3 штук. На Учалинском ГОК, являющемся лидером по производству, акцентируется особое внимание [2].

Подвержены влиянию разнообразных опасных факторов на производстве, в т.ч. аэрозолям, включающим в себя такие опасные элементы, как SiO₂, Cr, Pb, Cd, As и др., работники этого комбината [3]. Оценка риска, связанного с воздействием химических факторов, становится ключевой задачей. Она позволяет определить степень опасности, вызванной наличием конкретных веществ в рабочей среде [4]. Данный этап является немаловажным в обеспечении безопасности труда, а также в сохранении здоровья работающего населения.

Работник, длительное время находясь в окружении аэрозолей (промышленных), может подвергнуться определенному риску для своего здоровья. Оценка этого риска становится первоочередной задачей, так как она помогает выявить и измерить потенциальные опасности, связанные с конкретными химическими веществами на производстве.

Для успешной реализации этой цели необходимо акцентировать внимание на выявлении предпатологических изменений в организме на ранних этапах. Это особенно важно в тех случаях, когда явных клинических проявлений заболевания еще нет, но уже существуют условия, способствующие его развитию, такие как воздействие неблагоприятных производственных факторов.

Применение лабораторных исследований в медицине в настоящее время является ключевым элементом в выявлении ранних форм различных заболеваний. Эти исследования могут охватывать как общие патологии, так и те, которые связаны с профессиональной деятельностью.

Этот подход к диагностике значительно снижает заболеваемость, связанную с определенными видами работы. Раннее выявление предпатологических изменений позволяет эффективно предотвратить прогрессирование заболевания, обеспечивая более высокий уровень здоровья и благополучия работников [5].

В настоящее время вопрос нахождения действенных и нетравматичных методов для проведения ранней диагностики здоровья сотрудников остается актуальным. По этой причине тест микроядерный буккального эпителия (далее – БЭ) – лучший выбор для исследований (молекулярно-эпидемиологических). Посредством данного теста возможно оценить изменения цитогенетического характера, которые наблюдаются в самих клетках эпителия. Его плюсы: небольшая инвазивность сбора клеток, низкая стоимость, а также простота хранения и подготовки препаратов [6]. Метод микроядерного теста БЭ оценивает адаптационный статус организма и выявляет ксеногенную интоксикацию. Анализ изменений в ядрах БЭ может служить индикатором общего здоровья. Например, увеличение числа микроядер при воздействии стрессоров, таких как радиация или химические вещества, свидетельствует о наличии стресса. Микроядерный тест эффективно обнаруживает ксеногенную интоксикацию от внешних воздействий. Это важное средство для диагностики и мониторинга здоровья, которое помогает выявить патологии на клеточном уровне и принять соответствующие меры для поддержания организма в оптимальном состоянии [7].

Микроядерный тест выявляет микроядра в клетках, образующиеся непосредственно при повреждении ДНК. Они указывают на генетические изменения от химических воздействий, таких как радиация или токсины [4].

Ученые акцентируют внимание на самом состоянии эпителиоцитов носовых слизистых и полости рта [8; 9]. Большинство исследователей считают, что тест БЭ (микроядерный) – показатель, отражающий организменную реакцию непосредственно на разнообразные токсиканты, в частности на те, которые имеют мутагенный характер.

Микроядерный тест выявляет те процессы, которые связаны с повреждением ДНК, вызванным контактом с генотоксическими агентами. Отметим, что данный тест предоставляет ценную информацию о том, как именно организм реагирует на разнообразные вредные воздействия, например на воздействие химических веществ [10; 11].

Функциональная активность клеток БЭ зависит от степени их зрелости. Регуляция процессов дифференцирования, пролиферации и функциональных параметров зрелых клеток поддается воздействию факторов как местного, так и центрального генеза. Таким образом, состояние эпителиоцитов является объективным показателем интенсивности дестабилизационных механизмов.

Обнаруженные морфологические изменения в дифференцировке эпителия представляют интерес в качестве экспресс-тестов для оценки общего состояния здоровья. Эти изменения могут также служить индикаторами степени выраженности общесоматических нарушений.

Исследование направлено непосредственно на проведение анализа цитотоксических влияний на БЭ у работников промышленности (горнорудной) в возрасте не больше 30 лет.

Материалы и методы исследования

Исследование включало образцы БЭ, полученные от 130 сотрудников горно-обогатительного комплекса (ГОК) в процессе регулярного медосмотра.

Авторы провели исследование среди молодых работников горнорудного производства, разделив их на две группы. 1-я группа включала 76 человек, которые подвергались действию промаэрозолей с совокупным составом свинца диоксида кремния, меди, цинка. 2-я группа, состоящая из 54 человек, служила группой сравнения и не имела контакта с указанными аэрозолями.

Исследование включало работников 20-30 лет с опытом работы от одного до девяти лет (за исключением тех, кто имел стоматологические проблемы, и тех, кто имел вредную привычку – курение). Результаты подчеркивают влияние промышленных аэрозолей на здоровье, подчеркивая важность безопасности при работе с химически сложными веществами.

Конфиденциальность членов исследования соблюдена. Все образцы БЭ получили УИН, применявшийся непосредственно для маркировки. Отметим, что он в отношении принадлежности к определенному лицу не был разглашен.

Методическим указаниям «Обеспечение качества подготовки образцов биоматериалов для исследований цитологического характера № 2003/34», которые были утверждены Минздравом РФ от 10 марта 2003 г., мы следовали непосредственно для приготовления препаратов БЭ. Полученные сведения были занесены в БД (реляционную).

Далее производился анализ препаратов. Для этой цели был применен микроскоп марки «Микмед-5» с такими соответствующими увеличениями: 10 × 40 и 10 × 100. Это исследование включало в себя оценку частоты встречаемости клеток с определенными нарушениями, являющимися генетическими, а также эффектами цитотоксического типа. Внимание акцентировалось на различных клетках (распластанных), при этом все препараты рассматривались непосредственно на предмет не меньше, чем 1 тыс. клеток.

Таким образом, проведенное исследование не только строго соблюдало принцип конфиденциальности, но и предоставило подробные и объективные данные, которые позволяют сделать выводы о состоянии БЭ в исследуемых группах.

Микроядро – тело, которое является округлым или овальным хроматиновым.

Во время определения числа микроядер принимается во внимание непосредственно их процентное соотношение (к общему числу клеток, включающих в себя ядра) [12, с. 220-267; 13].

Во время проведения настоящего исследования были изучены разнообразные изменения, которые наблюдаются непосредственно в ядре клеток. Эти изменения проявлялись через такие явления, как деление ядра, уменьшение размера ядерных клеток, конденсация ядерной массы, разрушение ядра, разделение на фрагменты и образование вакуолей в ядре. Также наблюдаются нарушения непосредственно в самой структуре ядерных почек. С целью выполнения обработки статистических данных были применены Microsoft Excel, а также IBM SPSS Statistics.

С помощью данных инструментов осуществлялась проверка нормальности разделения показателей (количественного типа) непосредственно в самих группах. Для этой цели применялись соответствующие критерии Колмогорова – Смирнова.

Сопоставление параметров (количественного типа) в группах проходило непосредственно с критериями Стьюдента. Статистическая значимость была при p <0,05.

Результаты подтверждают вероятные изменения в ядрах клеток: увеличение микроядер; возникновение двуядерных клеток и прочих явлений (необычных). Важность данных корректировок, а также их взаимная связь с влиянием промаэрозолей подтвердил проведённый анализ данных (статистический).

Результаты исследования и их обсуждение

Группу горнорабочих разделили по стажу, чтобы изучить цитогенетические нарушения. Стаж, а также объем выборки для всех подгрупп содержатся в таблице.

В контрольной группе усредненные данные не превышают показателя частоты встречаемости клеток (с микроядрами) нормы. Они достигают значения, равного 0,2-0,5% [14]. Из проведенного анализа таблицы выше видно, что сотрудники, имеющие опыт работы непосредственно на горнорудном производстве в течение двух лет, демонстрируют устойчивую динамику увеличения данной частоты. Микроядра, которые представляют собой компоненты обособленного типа материала (генетического), могут являться фрагментами дезоксирибонуклеиновой кислоты, имеющей повреждения, или же хромосомами, оставшимися непосредственно в анафазе и не вошедшими непосредственно в ядро, являющееся основным [11].

Исследована частота клеточных аномалий и цитогенетических нарушений у работников с различным опытом трудовой деятельности. Установлена тенденция к возрастанию частоты цитогенетических отклонений в клеточных ядрах среди работников, проработавших более двух лет.

Средние значения и пределы варьирования кардиологических показателей клеток буккального эпителия обследуемых групп

Показатели, %

Стаж на производстве (горнорудном), кол-во лет

 

0

1

2

3-4

5

6-9

Выборка, чел.

54

15

17

13

15

16

Цитогенетические показатели

Интегр. показатель цитогенетического действия

0,3790

0,3160

0,828

0,563

0,2900

0,575

Показатель част. клеток с микроядрами

0,090 ± 0,0030

0,1680 ± 0,0040

0,335 ± 0,0030

0,2 ± 0,0090

0,196 ± 0,0040

0,185 ± 0,0040

Показатель част. клеток с протрузиями

0,090 ± 0,0030

0,0940 ± 0,0040

0,11 ± 0,0040

0,0670 ± 0,0040

0,086 ± 0,0050

0,111 ± 0,005

Показатель част. клеток с ядром атипичной формы

0,083 ± 0,001

0,034 ± 0,002

0,483 ± 0,0010

0,006 ± 0,0006

0,008 ± 0,000

0,223 ± 0,013

Показатели пролиферации

Интегр. показатель пролиферации:

0,1550

0,8580

1,2380

0,0410

0,3670

0,8460

частота клеток с двумя ядрами

0,1320 ± 0,0010

0,7430 ± 0,020

0,3280 ± 0,0020

0,1670 ± 0,0010

0,3430 ± 0,0020

0,2330 ± 0,0130

частота клеток с круглой насечкой

0,023 ± 0,0001

0,115 ± 0,001

0,910 ± 0,04

0,016 ± 0,0003

0,024 ± 0,0001

0,613 ± 0,03

missing image file

Показатель частоты встречаемости клеток БЭ на разнообразных стадиях деструкции ядра относительно стажа

У сотрудников с опытом работы от одного до двух лет и шести и более лет проявлялось наличие клеток с атипичной формой ядер. Отметим, что эти нарушения могут возникнуть из-за ошибок в делении хроматина в ядре, изменений в структуре хромосом во время митоза или же распределения (неправильного) хромосом непосредственно при анеуплоидии, когда клетка имеет неправильное число хромосом.

Такие закономерности отмечались непосредственно и для показателей нарушения пролиферации (клеточной), в т.ч. для показателя частоты клеток (двуядерных и с насечками круглой формы). Таким образом, выявленные аномалии могут быть связаны с длительным воздействием на организм факторов трудовой среды, приводящих к нарушениям клеточной структуры и деления, что подчеркивает важность мониторинга здоровья работников и принятия мер по снижению потенциальных рисков. Через митоз (полиплоидный) с частотой, увеличивающейся непосредственно под радиационным влиянием, образуются в большей степени клетки с двумя ядрами и клетки многоядерные [14, с. 63-64]. Проведение исследования показателей стадий ядерного разрушения в группах сотрудников показало следующие результаты: при проведении анализа данных выяснилось, что уровень клеток (дифференцированных) стал больше непосредственно у работников после 2-летнего стажа (трудового), но после этого отмечалось снижение. Клетки с хроматиновой конденсацией превалируют непосредственно на ранних стадиях разрушения ядра: их частота в значительной степени меньше по сравнению с группой (контрольной), что указывает непосредственно на более высокий показатель скорости обновления клеток в БЭ работников промышленности в области горнодобывающей деятельности.

Что касается частоты клеток на поздних этапах разрушения ядра, отмечается паттерн другого типа: частота сокращается непосредственно после 2-летнего стажа. И при этом она стабильна в последующем (рисунок). Ключевыми факторами, влияющими на эту частоту, оказываются кариолиз (от 10 до 65% в образцах) и фрагментация ядра (от 0 до 30% в образцах). Таким образом, результаты указывают на сложные процессы в ядрах клеток, изменяющиеся со временем и стажем работы, что влияет на общую картину клеточного обновления и разрушения.

Полученные результаты отвечают данным литературы, которые говорят непосредственно о цикле адаптивного преобразования у людей в начальные два-три года работы в новых обстоятельствах (экологических и климатических) с соответствующими факторами субэкстремального типа [15]. Начало работы в горнорудном производстве является новым стрессом для организма [6].

Заключение

В начале своей профессиональной карьеры молодые работники горнорудного производства сталкиваются с изменениями непосредственно на клеточном уровне. Проведённые исследования иллюстрируют, что в данный промежуток времени растет показатель частоты нарушений (цитогенетического характера) в соответствующих клетках БЭ. Особенно заметно увеличение числа клеток с микроядрами и тех, которые демонстрируют нарушения в процессе пролиферации. В это время происходит увеличение числа клеток БЭ с конденсацией хроматина непосредственно у молодых горнорабочих из-за снижения показателя интенсивности апоптоза и увеличения показателя скорости обновления, что может привести непосредственно к их медленному удалению из организма и, как следствие, к действию накопительного характера.

Таким образом, проведение микроядерного теста БЭ остается актуальным, обеспечивая диагностику профзаболеваний на ранних этапах и обнаруживая генетические изменения, которые были вызваны непосредственно влиянием химических веществ.


Библиографическая ссылка

Садртдинова Г.Р., Шайхлисламова Э.Р., Масягутова Л.М., Ахметшина В.Т., Рафикова Л.А., Музафарова А.Р. ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ В БУККАЛЬНЫХ ЭПИТЕЛИОЦИТАХ У РАБОТНИКОВ ГОРНОРУДНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ В ВОЗРАСТЕ ДО 30 ЛЕТ // Научное обозрение. Медицинские науки. – 2024. – № 1. – С. 10-15;
URL: https://science-medicine.ru/ru/article/view?id=1379 (дата обращения: 14.05.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674